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  • Dual Luciferase Reporter Gene Assay Kit

    双萤光素酶报告基因检测试剂盒

    ¥758.00 ¥848.00

    CW9312M

    100 T

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    本产品是一款以萤光素 (luciferin) 为底物用于检测哺乳动物细胞内萤火虫萤光素酶 (firefly luciferase) 和海肾萤光素酶 (Renilla luciferase) 活性的试剂盒。萤火虫萤光素酶是一种分子量约为61kD的蛋白酶,在ATP、镁离子和氧气的共同作用下催化luciferin氧化成oxyluciferin,从而产生波长为560nm的生物萤光 (bioluminescence) 。海肾萤光素酶是一种分子量为36kDa的蛋白酶,在氧气存在的条件下,可以催化腔肠素 (Coelenterazine) 氧化成Coelenteramide,在Coelenterazine氧化的过程中也会产生波长为465nm的生物萤光。这种萤光可以通过化学发光仪、酶标仪或液闪测定仪进行测定。本试剂盒的检测原理参考下图。

    在双萤光素酶报告基因检测中,萤火虫萤光素酶和海肾萤光素酶的活性可在单个样品中依次检测。先以萤光素为底物来检测萤火虫萤光素酶的活性,然后加入抑制萤火虫萤光素酶催化的物质,同时加入腔肠素检测海肾萤光素酶的活性,实现双萤光素酶报告基因检测。通过萤光素酶和其底物这一生物发光体系,可以非常灵敏、高效地检测基因的表达。


    通常把目的基因的转录调控元件或5'启动子区克隆在Luciferase 的上游,或把3'-UTR 区克隆在Luciferase 的下游,构建成报告基因(Reporter gene)质粒。然后转染细胞,用适当药物等处理细胞后裂解细胞,通过检测萤光素酶活性的高低来判断药物处理等对目的基因的转录调控作用。海肾萤光素酶更多地被用作检测转染效率的内参,以排除不同组之间细胞生长状况、细胞数目以及转染效率带来的干扰。


    本产品具有检测迅速、灵敏度高、检测范围广、无细胞内源活性干扰等优势。

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