核酸提取或纯化试剂
¥148.00
CWY012S
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| 保存条件 | 运输条件 |
|---|---|
| 0-35℃ | 常温 |
（1）裂解不完全：适当延长步骤4孵育时间，在孵育期间增加颠倒混匀次数；
（2）样品量太多：调整样品投入量，并按照比例加入裂解缓冲液和蛋白酶K。
若下游实验对pH值或EDTA敏感，可采用灭菌水作为洗脱液。使用前需调节水的pH值至7.0-8.5（可用NaOH调节），pH值低于7.0会显著降低洗脱效率。如需长期保存洗脱产物，推荐使用洗脱缓冲液洗脱，并于-20℃保存。
如下游实验对RNA污染较敏感，可加入4 μL无DNA酶的RNase A（100 mg/mL）
不可以。
1. A260/A280比值低（<1.7）。原因：蛋白或乙醇残留导致污染。解决方法：
1) 确保裂解充分：使用前请检查裂解缓冲液是否出现结晶或者沉淀，如有结晶或者沉淀，请将裂解缓冲液于56℃水浴孵育重新溶解。
2) 去除乙醇残留：吸附柱空离2分钟后将吸附柱置于室温数分钟，以彻底晾干。
2. A260/A280比值高（>2.0）。原因：RNA残留或核酸降解。
解决方法：
1) 可向其中加入4 μL RNase A（100 mg/mL）溶液，震荡15秒，室温放置5 分钟。RNase A本试剂盒并未提供，如需要可单独向本公司订购，货号：CW0601S。
2) 避免降解：使用新鲜样本，避免样本反复冻融。
3) 优化洗脱：若采用灭菌水作为洗脱液。使用前需调节水的pH值至7.0-8.5（可用NaOH调节）。
（1）应尽可能选择新鲜的样本；
（2）样本起始投入量不要超过所用方法的推荐范围；
（3）样品保存时要尽可能的避免反复冻融；
（4）样本应进行充分裂解：加入裂解缓冲液后颠倒混匀15次，剧烈震荡至少1分钟，可适当延长孵育时间；
（5）漂洗缓冲液1和漂洗缓冲液2中无水乙醇添加量不准确，应按照试剂瓶标签正确添加无水乙醇；
（6）洗脱不充分： DNA 产物洗脱的时候，预热洗脱液并滴加在膜中央位置，尽可能的覆盖整个吸附膜，增加洗脱体积或者二次洗脱也可增加产量。
