w66国际·利来(中国)最给力的老牌

  • 您当前的位置:首页 >产品中心

    核酸提取试剂

    ¥298.00

    CWY004M

    50次/盒

    - + [ 现货 ]

    加入购物车

    • 产品介绍
    • 产品参数
    • 产品说明书
    • FAQs

    本试剂盒适用于多种样本类型(如新鲜/冷冻动物组织、细胞、血液与细菌等)的DNA提取。其优化的缓冲体系可高效特异地将DNA结合至硅基质吸附柱,经两步洗涤有效去除PCR及酶促反应抑制剂,最终通过低盐缓冲液或水洗脱获得高质量DNA产物。所得DNA纯度高,可直接用于酶切、PCR、Real-Time PCR、文库构建、Southern blot、分子标记等下游实验。

    保存条件 运输条件
    0-35℃ 常温
    Q1:吸附柱堵塞该如何解决?
    A1:

    (1)裂解不完全:适当延长步骤裂解时间,在裂解期间增加颠倒混匀次数;

    2)样品量太多:调整样品投入量,并按照比例加入裂解缓冲液和蛋白酶K

    Q2:使用CWY004M提取的DNA出现RNA污染该如何解决?
    A2:

    如果下游实验对RNA污染比较敏感,可以在加入蛋白酶K 前加入4 μL DNase-FreeRNase A100 mg/mL)。

    Q3:是否可以将蛋白酶 K和裂解缓冲液预混?
    A3:

    不可以。

    Q4:能否用水洗脱DNA?
    A4:

    若下游实验对pH值或EDTA敏感,可采用灭菌水作为洗脱液。使用前需调节水的pH值至7.0-8.5(可用NaOH调节),pH值低于7.0会显著降低洗脱效率。如需长期保存洗脱产物,推荐使用洗脱缓冲液,并于-20℃保存。

    Q5:溶菌酶缓冲液如何配制?
    A5:

    20 mM Tris,pH8.02 mM Na2-EDTA 1.2% Triton X-100;终浓度为20 mg/mL的溶菌酶。

    Q6:DNA产量低的解决办法?
    A6:

    (1) 应尽可能选择新鲜的样本;

    (2) 样本起始投入量不要超过所用方法的起始量标准;

    (3) 样品保存时要尽可能的避免反复冻融;

    (4) 样本应进行充分裂解:组织样本应充分研磨或匀浆处理;延长56℃孵育时间(特别是难裂解样本如鼠尾可过夜消化);必要时可额外添加20μL蛋白酶K;如果提取次生代谢产物大量积累或细胞壁厚的细菌培养物的基因组,建议在对数生长期早期收集样品。

    (5)漂洗缓冲液1和漂洗缓冲液2中无水乙醇添加量不准确或漏加,应按照试剂瓶标签正确添加无水乙醇;

    6)洗脱不充分: DNA 产物洗脱的时候,预热洗脱液并滴加在膜中央位置,尽可能的覆盖整个吸附膜,增加洗脱体积或者二次洗脱也可增加产量。

    Q7:提取的 DNA 纯度低的原因及该解决办法?
    A7:

    1. A260/A280比值低(<1.7)。原因:蛋白或乙醇残留导致污染。解决方法:

    1) 确保裂解充分:使用前请检查裂解缓冲液1和裂解缓冲液2是否出现结晶或者沉淀,如有结晶或者沉淀,请将裂解缓冲液于56℃水浴孵育重新溶解。 

    2) 去除乙醇残留:吸附柱空离2分钟后将吸附柱置于室温数分钟,以彻底晾干。

    2. A260/A280比值高(>2.0)。原因:RNA残留或核酸降解。

    解决方法:

    1) 可在加入蛋白酶K 之前加入4 μL RNase A(100 mg/mL)溶液,震荡15秒,室温放置5 分钟。RNase A本试剂盒并未提供,如需要可单独向本公司订购,货号:CW0601S。

    2) 避免降解:使用新鲜样本,避免样本反复冻融。

    3) 优化洗脱:若采用灭菌水作为洗脱液。使用前需调节水的pH值至7.0-8.5(可用NaOH调节)。

  • 微信小程序

     客  服
     咨  询

    公众号二维码